Le kit tout-en-un SPINeasy DNA/ARN/Protéines utilise un flux de travail pratique et des colonnes de centrifugation à membrane de silice pour isoler les composants de l’ADN, de l’ARN et des protéines du même échantillon, sans utiliser de substances toxiques telles que le phénol et le chloroforme. L’utilisation de notre tampon de lyse R et de notre matrice de lyse A spécialement formulés en combinaison avec les instruments FastPrep® de MP Biomedicals permet une lyse très efficace des échantillons de tissus en quelques secondes.
Pour optimiser l'extraction d'ADN à partir de selles et éviter les lectures 'too low' sur un Qubit, il est crucial de maximiser la pureté et le rendement de l'ADN extrait. Utiliser un kit d'extraction comme le SPINeasy DNA/ARN/Protéines peut être avantageux grâce à sa capacité à isoler efficacement l'ADN sans substances toxiques. Assurez-vous d'utiliser un tampon de lyse adapté pour une rupture cellulaire efficace et une extraction optimale de l'ADN.
Avant l'extraction, homogénéisez soigneusement les échantillons pour garantir une répartition uniforme des cellules. Après l'extraction, une concentration et purification supplémentaires peuvent être nécessaires pour éliminer les contaminants potentiels. L'utilisation d'un bain-marie pour contrôler précisément la température pendant certaines étapes critiques peut aussi améliorer l'efficacité de l'extraction.
Enfin, ajustez les paramètres de votre Qubit pour une sensibilité accrue, et envisagez un pré-dilution stratégique des échantillons avant la mesure. Ces étapes combinées devraient améliorer la qualité des mesures et réduire les lectures 'too low'.
La méthode d'extraction phénol-chloroforme est essentielle pour purifier les acides nucléiques, mais nécessite une optimisation rigoureuse. Tout d'abord, il est crucial d'assurer une lyse efficace des échantillons. L'utilisation du kit SPINeasy ADN/ARN/Protéines, bien qu'il n'utilise pas de phénol-chloroforme, illustre l'importance des tampons de lyse adaptés. Ensuite, pendant la phase d'extraction, il est impératif de maintenir les échantillons à une température appropriée pour éviter la dégradation des acides nucléiques. L'utilisation d'un bain-marie avec contrôle précis de la température, allant de +5°C à 99.9°C, garantit cette stabilité thermique. Après l'ajout du phénol-chloroforme, une centrifugation adéquate est nécessaire pour une séparation efficace des phases aqueuses et organiques. Finalement, la récupération de l'ADN ou ARN doit être effectuée avec précaution pour éviter toute contamination croisée. Pour optimiser le rendement et la pureté, il est important d'adapter ces étapes selon la nature de l'échantillon initial et, si possible, de recourir à des protocoles validés et éprouvés, comme ceux proposés par Microsynth pour des matrices complexes.
