Comment Effectuer une expertise médico-légale des cheveux.
Les cheveux représentent des éléments de preuve cruciaux découverts sur les scènes de crime, régulièrement soumis à des tests de détection de drogues ou de carences nutritionnelles, ainsi qu'à des analyses d'ADN. Cependant, la préparation des échantillons de preuve constitue souvent un point de congestion dans le processus. Le choix optimal de matrice de lyse pourrait atténuer ces points de congestion, tout en maintenant voire en améliorant le rendement de l'analyte visé.
La matrice de lyse parfaite et le protocole d'homogénéisation associé :
- Réduisent de manière minutieuse et rapide les échantillons complexes.
- Génèrent des rendements élevés de l'analyte ciblé.
- Produisent des résultats hautement reproductibles.
- Éliminent les risques de contamination croisée.
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1.Faites votre choix de matrice de lyse
Les cheveux, en tant qu'échantillon complexe, requièrent l'utilisation de matrices de lyse résistantes et modérément rigoureuses, telles que celles fabriquées en acier inoxydable, pour une lyse exhaustive et efficace.
Parmi les options adaptées pour les échantillons capillaires, se distinguent les matrices de lyse Lysing Matrix S et Lysing Matrix SS de MP Bio, dont les différences résident dans leur taille respective. Les billes constituées d'acier inoxydable présentent un avantage particulier lorsqu'il s'agit d'extraire l'ADN des cheveux, car elles ne s'associent pas à l'ADN, garantissant ainsi un rendement supérieur par rapport aux matériaux potentiellement réactifs.
Matrice de lyse S : billes d'acier inoxydable d'1/8 de pouce
Lysing Matrix SS : Billes de broyage en acier inoxydable de 6,35 mm (légèrement plus rigoureuses)
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2.Mise en œuvre de votre matrice de lyse
L'utilisation des matrices de lyse se révèle aisée et affiche une efficacité accrue avec l'emploi d'appareils de battage spécifiquement conçus, tels que les équipements FastPrep de MP Bio.
En premier lieu, il est essentiel de choisir un tube de matrice de lyse adapté à la taille de votre échantillon. Les tubes Lysing Matrix S de 2 ml de MP Bio permettent de traiter jusqu'à 500 mg d'échantillon par préparation, tandis que les tubes Lysing Matrix S de 50 ml peuvent traiter jusqu'à 7 g par session. Sélectionner le tube approprié contribuera à rationaliser vos démarches médico-légales.
Pour les échantillons capillaires, vous pouvez directement déposer les cheveux sur la matrice de lyse à l'aide d'un tampon ou d'eau, bien qu'il soit recommandé de découper les cheveux en morceaux de 3 à 6 cm. Une fois chargés, insérez les tubes dans l'appareil FastPrep et soumettez les échantillons à la vitesse et aux intervalles de temps requis pour obtenir le niveau de lyse souhaité. Il peut être nécessaire d'ajuster les paramètres de traitement spécifiques afin d'optimiser et d'uniformiser le protocole.
L'utilisation de l'homogénéisateur de paillasse FastPrep-24MC a permis de réduire considérablement le temps d'extraction de l'éthyl glucuronide à partir d'une nuit à seulement 40 secondes pour les échantillons capillaires, surpassant ainsi la simple technique de coupe des cheveux. Le coût supplémentaire associé aux consommables et à l'équipement est compensé par les gains substantiels en termes de temps et d'amélioration du rendement d'extraction.
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3.Application pratique : Évaluation et protocole d'analyse d'éthyl glucuronide (EtG)
L'éthyl glucuronide (EtG) représente le marqueur privilégié pour évaluer l'abstinence et la consommation excessive chronique d'alcool.
La procédure courante implique l'incubation des échantillons d'EtG dans un bain de sonication durant la nuit, afin d'extraire les analytes des échantillons capillaires. Cependant, cette méthode engendre des temps de traitement nettement plus longs par rapport à d'autres essais en laboratoire. L'utilisation de billes en acier inoxydable en combinaison avec l'instrument FastPrep-24™ accélère le processus d'extraction et améliore le rendement d'EtG de 114 % comparativement à la sonication.
Protocole :
- Découper 75 mg d'échantillons capillaires en segments de 3 à 6 cm.
- Placer les échantillons capillaires découpés dans des tubes de 2 ml contenant des billes en acier.
- Ajouter de l'eau déminéralisée.
- Charger les tubes dans l'instrument FastPrep-24™ et les traiter pendant 2 cycles de 1 minute à une vitesse réglée à 6,0 m/s.
